样本提取工作液：用纯净水以 49：1 的体积进行稀释（即 1 份 50x 样品提取液+49 份纯净水）。配制方法：取出附件箱中 200mL 磨口玻璃瓶，加纯净水到 200mL 刻度线，用 5mL 移液器取 4mL 50X 样本提取液加入，摇匀贴上标签（标签内容“农残样本提取工作液”），使用后放冰箱保存，下次使用前请回温至 20℃-30℃,溶液可反复使用。

3 样本提取

1）蔬菜瓜果：取（2.0±0.01）g 果蔬样品（块茎类取(4.0±0.01)g）剪成 1cm 左右碎片，放入小烧杯中；加入 10mL 样本提取工作液，振荡 2min；

2）辛辣蔬菜：取（2.0±0.01）g 果蔬样品剪成 1cm 左右碎片，放入小烧杯中；加入 10mL 样本提取工作液，振荡 2min 于 90℃以上水浴 10min，冷却至室温待测；

3）茶叶：取(1.0±0.01)g 鲜茶放入小烧杯中，加入 10mL 样本提取工作液，静置 2min，取出提取液，静置 2min 待测。注：样本提取中若浸提液混浊，或浸提液色素干扰严重，可用活性炭进行脱色：即将浸提液转移至另一瓶中，加入(0.1-0.5)g 活性炭（根据颜色深浅进行调整），过滤待测。

4 测试

1）对照测试：于专用反应瓶（或 4mL 离心管）中加入 2.5mL 样本提取工作液，再分别加入 100μL 酶试剂，100μL 显色剂和 100μL 底物，混匀，并立即倒入 1cm 比色皿中，按仪器“对照”键并清零后，放入测试通道，测试吸光度变值ΔΑ0。对照值ΔΑ0 需符合酶活性要求（注意事项 6.1）才可进行样品的测试；

2）样品测试：于专用反应瓶中加入 2.5mL 待测样品清液，再加入 100μL 酶试剂，混匀，室温下放置10min 后，加入 100μL 显色剂和 100μL 底物，摇匀并立即倒入 1cm 比色皿中，于仪器选中“样品种类”，放入测试通道，测试吸光度变化值ΔΑt。

5 结果判定

1）以分光光度计测试时，按以下表达式计算出抑制率：抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt)/ΔΑ0]×100%；样品的抑制率在 40%～50%之间为可疑农残超标样品，抑制率大于 50%为农残超标样品，表明被测样品的农药残留可能超过安全的界定标准，建议用气相色谱等作进一步分析确认；

2）以农残检测仪，多功能仪检测时其抑制率一般可自动计算。样品的抑制率在 40%-50%之间为可疑农残超标样品，抑制率大于 50%为农残超标样品，表明被测样品的农药残留可能超过安全的界定标准，建议用气相色谱等作进一步分析确认。

6 注意事项

1）酶活性要求：参照 GB/T 5009.199-2003，1min 内的对照值（ΔΑ0）在 0.15-0.3 之间；3min 内的对照值（ΔΑ0）应大于 0.3；

2）保存：试剂盒应保存 4℃冰箱，保质期 12 个月；

3）使用：任何试剂使用时，用一瓶打开一瓶，用完后才使用新的，防止变质；

4）器具专用原则：任何用于移液的器具和容器都应各自贴上标签，单独使用，以免交叉污染；5）试剂只出不入原则：测试时，从任何试剂瓶吸出的试剂，禁止再次注射回试剂瓶；

6）常温测试：试剂盒使用之前，所有试剂应恢复到室温，当环境温度过低时（一般低于 20℃），测试时需作必要保温措施。